Ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng nitrocellulose at nylon membrane ay ang Ang nitrocellulose membrane ay may mataas na pagkakaugnay para sa protein binding samantalang ang nylon membrane ay may mataas na ugnayan para sa pagbubuklod ng nucleic acid. Bukod dito, ang mga pakikipag-ugnayan ng hydrophobic at electrostatic ay nagbubuklod ng macromolecules sa mga nitrocellulose membrane habang ang mga pakikipag-ugnayan ng ionic, hydrophobic, at electrostatic ay nagbubuklod ng macromolecules sa mga naylon membrane

Ang Nitrocellulose at nylon membrane ay dalawang uri ng lamad kung saan ang macromolecules ay inililipat mula sa gel. Gayunpaman, ang mga nitrocellulose membrane ay maaaring magamit upang itali ang DNA at RNA din.

Kaakibat, Biodyne A, Biodyne B, Nitrocellulose, Mga Nucleic Acid, Nylon, Laki ng Pore, Proteins

Ano ang isang Nitrocellulose Membrane

Ang Nitrocellulose membrane ay isang pangkaraniwang matrix na ginamit sa Western blotting dahil sa mataas na affinidad na nagbubuklod ng protina. Gayunpaman, maaari itong magamit upang makita ang mga nucleic acid bukod sa mga immobilized na protina at glycoproteins. Pangunahing nangyayari ang immobilization ng macromolecules sa pamamagitan ng hydrophobic na pakikipag-ugnayan. Ang mga bond ng hydrogen ay nabuo din sa pagitan ng mga nitro group ng lamad at ng mga chain ng amino acid na bahagi ng mga protina. Ang immobilization ng protina ay magiging mataas sa mataas na asin at mababang konsentrasyon ng methanol.

Larawan 1: Prinsipyo ng Blot

Ang mga nitrocellulose membrane ay magagamit sa 100% purong mga form ng nitrocellulose na may mataas na lugar sa ibabaw, na magkatulad. Ang magagamit na mga pre-size ay 0.2 μm at 0.45 μm. Ang maliit na laki ng pore ay mas mahusay para sa pagbubuklod na may maliliit na protina (<14 kDa). Ang kakayahang umiiral at mapanatili ang mga protina ay 80-250 μg / cm². Ang mga paunang natipon na lamad ay handa nang gamitin. Ang isa sa mga pangunahing bentahe ng nitrocellulose membranes ay ang napakababang background nito dahil madali itong ma-block. Ang mga suportadong nitrocellulose membrane ay maaaring hubarin at pasaway.

Ano ang isang Nylon Membrane

Ang naylon membrane ay isang malawakang ginagamit na matrix para sa pagbubuklod ng mga nucleic acid. Ang mga lamad ng naylon ay mekanikal na malakas kaysa sa mga nitrocellulose membrane. Ang dalawang pangunahing uri ng mga nylon membrane na ginamit sa pag-blotting ay ang Biodyne A at Biodyne B. Ang laki ng pore ng parehong uri ay 0.45 μm. Ang mga ito ay lumalaban sa init at solvents. Gayundin, hindi sila magpapakipot, pumutok o mapunit. Parehong nagbibigay ng mababang background kaysa sa nitrocellulose membrane.

Larawan 2: Southern Blot Membrane

Mga pagkakatulad sa pagitan ng Nitrocellulose at Nylon Membrane

Pagkakaiba sa Pagitan ng Nitrocellulose at Nylon Membrane

Kahulugan

Ang nitrocellulose membrane ay tumutukoy sa isang malagkit na lamad na ginagamit para sa immobilizing mga nucleic acid at protina sa pag-blotting habang ang nylon membrane ay tumutukoy sa isang uri ng lamad na may mataas na lakas at paglaban sa init na ginamit upang mai-immobilize ang macromolecules.

Binubuo ng

Ang mga nitrocellulose membrane ay binubuo ng nitrated cellulose habang ang mga nylon membrane ay binubuo ng hindi nabago o positibong sisingilin ng Biodyne A at Biodyne B nylon.

Sinlaki ng butas ng balat

Ang laki ng pore ng mga nitrocellulose membrane ay 0.2 μm at 0.45 μm habang ang laki ng butas ng mga nylon membrane ay 0.45 μm.

Lakas

Ang mga nitrocellulose membrane ay malutong at sa gayon ay hindi magagamit muli habang ang mga nylon membrane ay malakas sa mekanikal.

Pamamaraan sa Paglilipat

Pangunahing ginagamit ang electrophoretic transfer sa paglilipat ng mga protina papunta sa nitrocellulose membrane habang ang capillary transfer ay ang karaniwang kasanayan sa mga nylon membrane.

Pakikipag-ugnay

Ang mga nitrocellulose membrane ay may mataas na pagkakaugnay sa protina habang ang nylon membrane ay may mataas na pagkakaugnay sa mga nucleic acid. Ang Nitrocellulose membrane ay maaari ding gamitin para sa mga nucleic acid.

Pag-blotter

Ang mga nitrocellulose membrane ay mas mahusay para sa Western blotting habang ang nylon membrane ay mas mahusay para sa Southern at Northern Blotting.

Mga Pakikipag-ugnay na Binding

Ang mga pakikipag-ugnayan ng hydrophobic at electrostatic ay nagbubuklod ng macromolecules sa mga nitrocellulose membrane habang ang mga pakikipag-ugnayan ng ionic, hydrophobic, at electrostatic ay nagbubuklod ng macromolecules sa mga naylon membrane.

Kapasidad sa Pagbubuklod ng Protina

Ang kapasidad ng umiiral na protina ng nitrocellulose membrane ay 80-250 μg / cm² habang ang kapasidad ng umiiral na protina ng nylon membrane ay 150-200 μg / cm².

Konklusyon

Ang Nitrocellulose membrane ay isang malutong lamad na pangunahing ginagamit upang makapagpalipat-lipat ng protina sa Western blotting habang ang nylon membrane ay isang malakas na lamad na pangunahing ginagamit upang mai-immobilize ang mga nucleic acid. Ang mga nitrocellulose membrane ay nagbubuklod ng mga molekula sa pamamagitan ng mga pakikipag-ugnayan ng hydrophobic habang ang mga nylon membrane ay nagbubuklod ng mga molekula sa pamamagitan ng mga pakikipag-ugnayan sa electrostatic. Samakatuwid, ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng nitrocellulose at nylon membrane ay ang pagkakaugnay.

Sanggunian:

1. "Nitrocellulose Membranes para sa Western Blotting | Thermo Fisher Scientific - LK. ” Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Magagamit Dito2. "Biodyne A Nylon Membrane, 0.45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Magagamit Dito3. "Biodyne B Nylon Membrane, 0.45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Magagamit Dito

Kagandahang-loob ng Larawan:

1. "Blot biology" Ni Gbdivers - Sariling gawain (CC BY-SA 3.0) sa pamamagitan ng Wikimedia Wikimedia2. "Southern blot membrane" Ni Bojan Žunar - Sariling gawain (CC BY-SA 4.0) sa pamamagitan ng Wikimedia Wikimedia