Ang isang proseso ng pagkakaiba sa paglamlam ay ginagamit sa paglamlam ng mga endospore. Ang malachite green ay ang pangunahing mantsa na ang mga mantsa ng parehong mga vegetative cells at endospores sa loob ng sample. Pagkatapos, ang paggamit ng init ay nakakatulong upang maarok ang pangunahing mantsa sa endospore. Pagkatapos ng decolorization, ang counterstain safranin ay ginagamit upang mantsahan ang background.

Dalawang pathogenic genera na kilala bilang Bacillus at Clostridium ay gumagawa ng mga metabolikong hindi aktibong endospore upang labanan ang masamang kondisyon sa kapaligiran. Dahil ang endospores ay nagdudulot ng isang bilang ng mga nakamamatay na sakit, ang pagkakakilanlan ng mga ito ay lubos na mahalaga sa mga klinikal na sample.

Saklaw ng Mga Susing Lugar

1. Ano ang mga Endospores - Kahulugan, Katotohanan 2. Ano ang Endospore Staining - Mga diskarte ng Endospore Stenting 3. Bakit Ginamit ang Heat sa Endospore Stenting - Paggamit ng Heat

Pangunahing Mga Tuntunin: Endospores, Heat, Malachite Green, Pores, Vegetative Cells

Ano ang mga Endospores

Ang endospore ay isang lumalaban na istraktura na ginawa ng ilang mga pathogenic bacterial genera tulad ng Bacillus at Clostridium upang mabuhay sa ilalim ng hindi kanais-nais na mga kondisyon sa kapaligiran. Ang mga hindi kanais-nais na kundisyon na ito ay maaaring maging init, pagkalaglag, radiation o kemikal. Ang proseso ng paggawa ng mga endospore mula sa mga vegetative cells ay tinatawag na sporulation. Maaaring tumagal ng 8-10 na oras upang makumpleto ang proseso. Ang endospores ay maaaring manirahan sa loob ng bacterial cell o maaaring mayroon bilang mga libreng spore. Ang pagbuo ng endospore ay ipinapakita sa pigura 1.

Larawan 1: Bumuo ng Endospore

Ang mga endospore ay hindi aktibo sa metabolismo o tulog. Naglalaman ang mga ito ng isang maliit na halaga ng cytoplasm at DNA na sakop ng isang proteksiyon panlabas na pantakip. Ang cell wall ay binubuo ng dipicolinic acid, na nagbibigay ng mga katangiang lumalaban sa init sa endospore. Ang mga endospores ay tumutubo upang makabuo ng mga bagong organismo kapag naging kanais-nais ang mga kondisyon sa kapaligiran. Ang paggamot ng basa-basa na init sa 121 ° C sa loob ng 15 minuto ay maaaring makasira sa mga endospore ng bakterya.

Ano ang Endospore Staining

Ang paglamlam ng endospore ay isang kaugalian na proseso ng paglamlam kung saan ang iba't ibang mga istraktura ng ispesimen ay nabahiran ng iba't ibang kulay. Pinapayagan nitong makilala ang mga endospore mula sa mga vegetative cell. Ang karaniwang proseso ng pag-stain ng endospore ay ang diskarteng Schaeffer-Dulton. Ang pangunahing mantsa sa diskarteng ito ay malachite green, at ang counterstain ay safranin.

Schaeffer-Dulton Technique - Pamamaraan

1. Matapos magpahid sa isang slide ng mikroskopyo, payagan ang sample ng bakterya na mababad sa malachite green solution.2. Pagkatapos, dahan-dahang painitin ang slide ng 3-5 minuto hanggang sa magsimulang sumingaw ang tina.3. Pahintulutan ang slide na palamig at hugasan ito ng tubig para sa decolorization.4. Panghuli, pagkatapos ng counterstain, banlawan ang slide.5. I-air dry ang slide at obserbahan ito sa ilalim ng isang mikroskopyo.

Dito, ang mga endospore ay nabahiran ng berde na may malachite green at mga vegetative cell ay namantsahan ng kulay rosas na kulay na may safranin. Ang mga nabahiran na endospore ni Schaeffer-Dulton na diskarte ay ipinapakita sa pigura 2.

Larawan 2: Endospores (berde) at Mga Vgetative Cells (rosas)

Ang isang kahaliling pamamaraan ng paglamlam ng endospore ay maaaring makilala bilang pamamaraan ni Doner. Ang mga endospores ay mamantsahan ng pula sa pamamaraang ito.

Bakit Ginamit ang Heat sa Endospore Stenting

Ang keratin na takip ng mga endospores ay lumalaban sa paglamlam. Samakatuwid, ang pangunahing mantsa ay kailangang pilitin sa endospore. Ang paggamit ng init ay upang mapagbuti ang pagtagos ng pangunahing mantsa sa endospore. Ang slide na may malachite green ay maaaring maiinit hanggang sa 3-5 minuto. Ang oras ng pag-init ay direktang proporsyonal sa dami ng mga tina na natagos sa pader ng mga endospore. Ang mga mas mahabang oras ng pag-init ay gumagawa ng mga pores sa endospore wall, na pinapabilis ang pagtagos ng mas maraming mga tina.

Konklusyon

Ang Endospores ay ang mga reproductive cells ng karamihan sa mga pathogenic bacteria. Samakatuwid, ang pagkilala sa mga endospore sa isang sample ay kritikal sa mga diagnostic.

Sanggunian:

1. "Endospore Stain - Pag-unawa sa Mga Kahulugan, Mga Diskarte at Pamamaraan." MicroscopeMaster, Magagamit dito.

Kagandahang-loob ng Larawan:

1. "Endospore Formation" Ni Farah, Sophia, Alex - Sariling gawain (CC BY-SA 4.0) sa pamamagitan ng Wikimedia Wikimedia2. “Bacillus subtilis Spore” Ni Y tambe (orihinal na uploader) - Sariling gawain (CC BY-SA 3.0) sa pamamagitan ng Commons Wikimedia